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資料信息
  • 24 2024-05
    WesternBlot原理、顯色分類及操作步驟

    與Southern或Northern雜交方法類似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測物是蛋白質,“探針”是抗體,“顯色”用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品,轉移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質,且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原,與對應的抗體起免疫反應,再與酶或同位素標記的第二抗體起反應,經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用于檢測蛋白水平的表達。既可以定性,又可以半定量的Western是初步鑒定蛋白質最方便也是最通用的方法。

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  • 22 2024-05
    細菌的芽孢染色(spore staining)實驗方法

    細菌的芽胞具有厚而致密的壁,透性低,不易著色,若用一般染色法只能使菌體著色而芽胞不著色(芽孢呈無色透明狀)。芽孢染色法就是根據芽孢既難以染色而一旦染上色后又難以脫色這一特點而設計的。所有的芽孢染色法都基于同一個原則:除了用著色力強的染料外,還需要加熱,以促進芽孢著色。當染芽孢時,菌體也會著色,然后水洗,芽孢染上的顏色難以滲出,而菌體會脫色。然后用對比度強的染料對菌體復染,使菌體和芽孢呈現出不同的顏色,因而能更明顯地襯托出芽孢,便于觀察。

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  • 21 2024-05
    牛血清白蛋白分類與作用介紹

    牛血清白蛋白是血液中的主要成分(38g/100ml),分子量68kD,等電點4.8,含氮量16%,含糖量0.08%,僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。牛血清蛋白溶液可以作為測量蛋白質含量的標準曲線用。

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  • 20 2024-05
    酸堿滴定實驗步驟+注意事項

    注意觀察液滴落點周圍溶液顏色變化。開始時應邊搖邊滴,滴定速度可稍快(每秒3~4滴為宜),但是不要形成水流。接近終點時應改為加一滴,搖幾下,最后,毎加半滴,即搖動錐形瓶,直至溶液出現明顯的顏色變化,準確到達終點為止。

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  • 17 2024-05
  • 16 2024-05
    簡述質粒載體基本信息與應具備的條件

    自然界中,質粒是在營養充足時出現的,它在結構、大小、復制方式,每個細菌的拷貝數,在不同的細菌體內的繁殖力不同,在菌種之間的轉移力等方面都會變化,可能最重要的是質粒所攜帶的特征的改變。大多數原核生物的質粒是雙鏈環狀的DNA分子;但是無論是在革蘭氏陽性還是陰性菌體內都可以發現線狀質粒。質粒大小變化很大,可從幾個到數百個kb。
     

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  • 15 2024-05
    【細胞培養實驗】貼壁細胞與懸浮細胞的培養差異

    由于貼壁細胞貼壁生長,接觸抑制,長滿一瓶后貼壁較緊,不易取出。這時必須用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶處理,使其分散開后取出,然后在放入新的培養瓶中培養。

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  • 14 2024-05
    細胞凍存原理+操作步驟+注意事項

    當細胞所處溫度低于0°C時,細胞脫水,細胞中可溶性物質濃度升高,并在細胞內形成冰晶,冰晶的大小對細胞的影響是不同的,大冰晶容易造成細胞膜、細胞器的損傷和破裂,故造成復蘇出來的細胞存活率、狀態等與凍存前的狀態相差甚遠。因此,我們在凍存細胞的時候會采取兩個措施,一加入低溫保護劑,二,慢凍細胞。

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  • 13 2024-05
    培養基傾注溫度小常識

    目前多數實驗室培養基滅菌后會放置水浴或者烘箱中,需使用的時候拿出來直接倒板。但培養基靜置時間不宜過長,靜置時間一般不超過4小時。靜置時間過長,培養基中瓊脂可能會少量凝固,形成類似絮狀析出。

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  • 11 2024-05
    免疫熒光標記常用的熒光染料具備條件

    免疫熒光(Immunofluorescence,IF)原理免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。它是根據抗原抗體反應的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原(或抗體)。利用熒光顯微鏡可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質和定位,以及利用定量技術(比如流式細胞儀)測定含量。

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