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CTAB抽提液

¥240.00
R1368

抽提植物基因組DNA

主要由CTAB、氯化鈉、EDTA等組成,附送 2-巰基乙醇,臨用前按比例加入。
儲存條件:室溫,24個月

產品簡介

從植物組織中制備基因組DNA較常采用的方法有氯化離心法、CTAB抽提法等,CTAB抽提法是經典的植物DNA提取法,可以用于多種不同類型植物樣品DNA的提取,獲得的量很高,但是純度一般,但是足夠用于大多數分子生物學實驗。

CTAB抽提液的有效成分為CTAB(十六烷基三乙基溴化銨),臨用前加入2-ME,使其更有效,更穩定。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途

自備材料

1、液氮\研缽或勻漿器、離心管、恒溫箱或水浴鍋、離心機

2、氯仿/異戊醇(24:1)、高鹽TE緩沖液、異丙醇、75%乙醇、TE緩沖液

操作步驟(僅供參考)

1、取5ml適量的CTAB抽提液,按CTAB抽提液:2-ME=50:1的比例混勻,置于15ml或其他規格的離心管中,60℃預熱;如有必要可加入1~5μg/ml的RNaseA,以便去除殘余的RNA。

2、稱取1~1.5g或適量新鮮植物組織或葉片,用預冷的液氮或干冰冷卻研缽或勻漿器,將新鮮植物組織或葉片粉碎成細粉末,將冷凍的組織轉移至離心管中。

3、向粉碎后的組織中按4~5ml/g加入預熱的CTAB抽提液,充分混勻,65℃溫育15~60min,并不時混勻。

4、加入等體積氯仿/異戊醇(24:1),顛倒充分混勻,8000g離心5~10min,回收上層水相(即上清液,該上清液中含有所需DNA)。

5、轉移上清液,加入1/2~2/3體積預冷的異丙醇,輕輕混勻,室溫靜置使核酸沉至管底;如果觀察不到沉淀,可在室溫下靜置數小時至過夜。2000g離心2min,輕輕棄上清液。

6、在松散的DNA沉淀物上加入75%乙醇,室溫靜置20min,4000g離心10min,輕輕棄上清液。

7、自然干燥DNA,加入適量去離子水或TE緩沖液,-20℃保存。

注意事項

1、如果每次的使用量很小,可以適當分裝后再使用。

2、試劑如有絮狀沉淀,可于50~75℃水浴中助溶,如仍有大量沉淀應棄用。

3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

象形圖
警示語
Class
警告聲明
UNub
危險聲明
Packing Group
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